У кошек и собак, содержащихся с пациентами с COVID-19, возможен специфический иммунный ответ на SARS-CoV-2, сообщает News Medical.
Новый иммуноанализ на основе проточной цитометрии и покрытых рекомбинантным нуклеопротеином SARS-CoV-2 (Np) парамагнитных гранул пролил свет на развитие коронавирусной инфекции у домашних животных. Благодаря исследованию образцов, взятых до и во время пандемии, удалось установить восприимчивость кошек и собак к коронавирусной инфекции.
В недавнем исследовании Research in Veterinary Science исследователи провели подробное картирование эпитопов Np и разработали экспериментальный иммуноферментный анализ (ELISA) на основе двойного антигена с использованием С-концевой субъединицы конъюгата пероксидазы хрена (HRP).
В ходе эксперимента использовались нуклеотидные последовательности белка N SARS-CoV-2 и белка, выделенного из других связанных с животными коронавирусов (SARS-CoV-1, MERS-CoV). В качестве базового исследуемого материала с марта 2020 года по ноябрь 2020 года была собрана сыворотка крови 506 домашних животных. Среди этих образцов 15 животных оказались положительными на SARS-CoV-2. Примечательно, что все сыворотки животных были протестированы с помощью тестов ELISA с двойным антигеном и PRNT. Также были собраны образцы сыворотки у 23 пациентов с COVID-19.
Набор предпандемических сывороток от 234 собак и 35 кошек использовали для оценки специфичности анализа двойного антигена Np. Также были протестированы три сыворотки от кошек, которые ранее были положительными на коронавирус кошек, три сыворотки собак, которые были положительными на респираторный коронавирус собак, пять сывороток собак, которые были положительными на энтеральный коронавирус собак, и восемь сывороток быков, которые были положительными на коронавирус крупного рогатого скота.
Сыворотку от собаки, госпитализированной с интерстициальной пневмонией, сравнивали с набором сывороток от домашних животных, содержащихся с пациентами с COVID-19. Эти образцы были протестированы против тех же девяти субъединиц ELISA. Было обнаружено, что они обладают высокой реактивностью по отношению к одному и тому же перекрывающемуся фрагменту (D+E), распознаваемому человеческой сывороткой. Как только была идентифицирована эта иммунодоминантная область D+E, был разработан ИФА с двойным антигеном для обнаружения иммуноглобулинов (Ig), выделенных из нескольких видов.
Также было отмечено, что сыворотки допандемической эпохи, а также сыворотки, полученные от животных, которые были естественным образом инфицированы различными коронавирусами, были значительно ниже порогового значения для теста ELISA с двойным антигеном. Однако сыворотка трех собак из 278 оказалась реактивной с помощью ELISA с двойным антигеном. Среди этих образцов одна сыворотка показала высокую реактивность в отношении антигена собачьего респираторного коронавируса (CRCoV), в то время как другая была полностью отрицательной в отношении антигенов CRCoV и собачьего кишечного коронавируса.
В целом текущее исследование показало, что картирование эпитопа Np SARS-CoV-2 привело к идентификации иммунодоминантной области, расположенной в С-концевой части белка. ELISA на основе двойного антигена с использованием этой части в качестве конъюгата HRP улучшает серологическое тестирование различных животных и, следовательно, может быть полезным инструментом для многовидового мониторинга COVID-19 у восприимчивых животных.